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求助!本人纯分子克隆的小白,但是不好意思所有的问题都问师兄师姐,还望各种虫友相助!最近用BamH1和MluI双酶切,都是NEB的HF省时酶,cusmart缓冲液,公司说明书上说这两种酶在cusmart中效率为100%,但是我现在的载体根本切不开,我在网上查的M...
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最近在看分子方面的文献,了解到目前最热门的基因编辑工具CRISPR/CAS9,也是分子生物学研究的基础,但是第一次接触这方面知识,理解起来太困难了,各位谁在做这个方向,求指点!!!非常感谢!
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请问有哪位分子高手能告知下做Ta克隆用的PMD19-T载能通过感受态细胞克隆出来拿?最近老师经费紧缺,不让买商用T载,原核表达的环状表达载体倒是有扩过,但是实验室的师兄师姐说没有听说过哪个实验室自己扩增T载,是真的吗(⊙x⊙希望高手不吝赐教
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各位虫友,我提出来RNA,之后反转剧成cDNA,作为模版经营PCR,跑胶显示有目的条带,然后我再用p出来的产物作为模版,就p不出来了,请问这是什么问题?跑电泳,条带就在胶孔附近
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求助:能用的VectorNTI资源,不限版本,自己在网上下载的都不能用,好多都是安装到最后提示缺少DLL文件,谢谢各位
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如图,所用酶在目标DNA上是单酶切位点,第一次杂交出来2条带,第二次杂交出来4条带,为什么条带数会多了呢?有大神能告知一下可能的原因吗?感谢!
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我要培养LBA4404只加利福平可以吗?
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我之前做的标曲如果用每一个稀释度样品的平均值,标曲的R方值为0.98多,达不到0.99以上,所以我选取了其中一个稀释样品的三个重复中的某一个值,标曲的R方值就能达到0.99以上,我这种情况,需要再重新做一遍吗
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插入片段是300bp,载体大小是4950bp.根据质粒图谱我在目的片段两端设计了两个酶切位点ECOR1和Bamh1.PCR扩增后得到带有酶切位点的目的片端和质粒进行双酶切,PCR产物的酶切:PCR产物23μ,ECOR1/BamH1,2μ,10*K3μ合计30μ...
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下面两个小实验怎么做第一张连图也看不懂临床转的分子生物学研究生溶液稀释也弄不懂加微信现金悬赏
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各位虫友,最近实验室要购进电泳仪用于分子生物学实验的凝胶电泳,不知道北京六一的电泳仪如何?请各位推荐一下,非常感谢!
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pcr扩增,退火温度55°(之前试过一次50°条带更加不清晰),循环次数30酶:LATaq酶模板:cDNA前四泳道条带有些多,但颜色很淡,无法回收后八泳道,就几乎看不见了……我很迷茫,不清楚是退火温度酶模板还是其他什么原因
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养的RGM–1胃粘膜上皮细胞,用的进口血清,自己分装培养基,分装PBS,用的都是巴氏消毒吸管操作,每次小心翼翼紫外消毒,操作,细胞还是不可避免的污染了。复苏的细胞都不能幸免于难。求大神给看看是怎么回事。老有这种小黑点,图片上传的是昨天刚复苏的培养基,第二天就这...
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本人新手,最近要做细胞试验,需要用到抑制剂,但是现在遇到了一些问题,请各位老师或者大神指教。因为本抑制剂说明书标明需要用DMSO溶解,上网查了下,0.1%的DMSO对细胞没有显著影响。现在手里有10mg的NPS2143抑制剂,说明书标明:稀释成5mM需要DMS...
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提了很多次叶绿体DNA跑胶都不明显,不是条带拖,是条带根本就不太亮,用百分之1.5的琼脂糖凝胶跑电泳,2μ升的溴酚蓝加7μ升的提出来的DNA样混合点样,就想问一下大神们问题可能出在哪里,是样品量不够吗?还是EB不太够?我的提取方法也就是原始文献里的冰域研磨,高...
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由于实验需要,最近想制备多克隆抗体,可是不知道哪个公司好。所以想请教一下,有没有什么公司可以推荐的啊?
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老师,请问有哪些软件可以绘制G-quadruplex等结构?biostar2009
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我在测序的上面找到了自己的特异性引物,但是找不到试剂盒里面的shortprimer(upn),那我是不是没找到这个引物就表示失败了请问测序后的这个序列我到底要如何分析才知道我测得这个是正确的
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各位大神,我用庄盟还有takara的试剂盒提柳树叶片RNA,可能因为多糖多酚类物质含量太多加完无水乙醇会有絮状沉淀始终提不出来,同样的条件杨树叶片就很容易能提出来,加完无水乙醇也没有絮状物质沉淀
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胶孔亮度很高,拖尾严重,求解答为什么出现这种现象
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第一次做细胞实验,使用的是L929细胞测细胞毒性,使用高糖培养基进行培养,参考文献使用的是1640培养基,做出的图片细胞形态是梭形,我做的实验结果如图所示,细胞形态是圆圆的,请问各位老师是不是我使用的培养基不对?还是图中929细胞形态是正常的呢?
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老师您好,我用TBE缓冲液配置1%琼脂糖凝胶电泳,打算分离质粒的三种结构,但是电泳的结果显示线状在比超螺旋跑的快,能请问一下是什么原因吗biostar2009
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有人用过plantcare分析过植物的启动子吗?为什么我分析的一直显示“Serverbusy,pleasebepatient,36runningbeforeyourjob”,换过谷歌,IE,火狐,360浏览器都是这样,我还在不同电脑是操作都是这样。大牛们能为我...
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想通过双酶切在pET30a质粒上连入两个基因,一个长4000bp,一个长3700bp。现在4000bp的已经连接上了,没有任何问题。在此基础上做了3700bp的连接,随后将连接产物转入Trans5α感受态,挑取单菌落验证可以将3700bp的基因验出。当把得到的...
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请问在PCR添加剂中,除了甜菜碱和BSA外,还有什么方法能降低PCR产物的弥散吗?急
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想做稳转,有定点整合的试剂盒或质粒吗?
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胶回收最后ElutionBuffer加的有点多,导致产物浓度比较低,有没有什么可以浓缩的办法
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修饰探针是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA),而基因芯片技术就是指利用大规模集成电路的手段,控制固相支持物合成数以千万计的寡核苷酸探针,并把它们有规律地排列在小面积的支持物上,然后将研究的材料,用荧光标记后在芯片上与探针...
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图是不同时期关于差异基因表达上调的维恩图,这种图咋分析,能从图中找到一些规律吗,请各位大神帮忙指导一下up-1.png
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这个季节,用试剂盒提取老叶的RNA,不管是液氮研磨还是常温研磨,总是提不出来,有什么方法可以改进吗?
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